| 大肠杆菌志贺毒素stxB融合基因的构建及其高效表达 |
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| 引用本文： | 刘军,冯书章,齐翀,孙洋,祝令伟,郭学军,尹铁勇,庄永菊.大肠杆菌志贺毒素stxB融合基因的构建及其高效表达[J].中国兽医学报,2005,25(1):28-30. |
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| 作者姓名： | 刘军 冯书章 齐翀 孙洋 祝令伟 郭学军 尹铁勇 庄永菊 |
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| 作者单位： | 解放军军需大学军事兽医研究所,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (3 0 2 70 985 ) |
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| 摘 要： | 利用PCR方法，从肠出血性大肠杆菌O157：H7的基因组DNA中，分别扩增出Stx1B和Stx2B亚基的结构基因片段，然后再通过PCR将这2个片段连接起来，并定向克隆到表达质粒pET28a的Nco1和EcoR 1位点之间，构建了重组表达质粒pMB1。将重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3)中，对重组菌株BL21(pMB1)用IPTG进行诱导表达，并对最佳诱导时间进行了探索。SDS-PAGE电泳检测结果表明。重组菌株表达出了16300的目的蛋白Stx2B-L-Stx1B；经薄层扫描分析表明，表达量约占菌体总蛋白的68．4％，且目的蛋白为包涵体表达，表达量约占细菌沉淀的84．6％。研究还表明，未用IPTG诱导的BL21(pMB1)菌株也可有少量目的蛋白的基础表达。不同诱导时间的结果表明，在3～7h的诱导时间内，目的蛋白的表达量没有明显变化。
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| 关 键 词： | MB 表达量 蛋白S 融合基因 志贺毒素 再通 薄层扫描 诱导时间 位点 IPTG |
| 文章编号： | 1005-4545(2005)01-0028-03 |
| 修稿时间： | 2003年12月29 |
Construction and High-level Expression of EHEC stxB Fusion Gene |
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| LIU Jun,FENG Shu-zhang,QI Chong,SUN Yang,ZHU Ling-wei,GUO Xue-jun,YIN Tie-yong,ZHUANG Yong-ju.Construction and High-level Expression of EHEC stxB Fusion Gene[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2005,25(1):28-30. |
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| Authors: | LIU Jun FENG Shu-zhang QI Chong SUN Yang ZHU Ling-wei GUO Xue-jun YIN Tie-yong ZHUANG Yong-ju |
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| Institution: | LIU Jun,FENG Shu-zhang~*,QI Chong,SUN Yang,ZHU Ling-wei,GUO Xue-jun,YIN Tie-yong,ZHUANG Yong-ju |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Shiga toxin B subunit fusion protein high-level expression inclusion body |
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