根癌农杆菌介导的葡萄遗传转化体系的优化 |
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引用本文: | 董志刚,马小河,王国平,赵旗峰,李晓梅,谭伟,王敏,唐晓萍.根癌农杆菌介导的葡萄遗传转化体系的优化[J].核农学报,2014(7). |
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作者姓名: | 董志刚 马小河 王国平 赵旗峰 李晓梅 谭伟 王敏 唐晓萍 |
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作者单位: | 山西省农业科学院果树研究所; |
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基金项目: | 山西省自然科学基金(2011011029-2);山西省农业科学院育种项目(YYZJCD07) |
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摘 要: | 以梅鹿辄葡萄离体叶片为转化材料,对根癌农杆菌介导的遗传转化过程中涉及的几个主要影响因素:抗菌素羧苄青霉素(Carb)的浓度、乙酰丁香酮(AS)的浓度、农杆菌菌液的浓度及卡那霉素筛选压进行优化。结果表明,抗菌素羧苄青霉素在浓度300mg·L-1下即可有效去除农杆菌,且对胚性愈伤组织的分化的影响不大;乙酰丁香酮(AS)的最适浓度为50μm·L-1;农杆菌菌液的浓度控制在OD6000.5~0.7时转化率最高;卡那霉素的筛选浓度控制在100mg·L-1。利用优化的农杆菌介导法进行转化,对再生苗进行PCR检测,结果显示,外源基因已导入了葡萄基因组中。本研究优化了农杆菌介导的葡萄遗传转化影响因素,并获得了转基因植株。
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关 键 词: | 葡萄 根癌农杆菌 遗传转化 npt-Ⅱ基因 |
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