| 鸡白细胞介素-18(ChIL-18)重组蛋白的生物学活性检测 |
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| 引用本文： | 李宏梅,胡敬东,马凤龙,郑玉姝,刘翠艳,田兆菊,赵宏坤.鸡白细胞介素-18(ChIL-18)重组蛋白的生物学活性检测[J].农业生物技术学报,2007,15(1):5-10. |
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| 作者姓名： | 李宏梅 胡敬东 马凤龙 郑玉姝 刘翠艳 田兆菊 赵宏坤 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 山东信得药业,青岛,266061 |
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| 基金项目： | 山东农业大学校科研和教改项目;国家科技支撑计划重大项目;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 |
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| 摘 要： | 对含有鸡白细胞介素-18(ChIL-18)基因的质粒在大肠杆菌(Escherichia coli)内进行诱导表达,经亲和层析法对表达产物进行纯化,用微量细胞病变抑制法CEF-VSV系统,检测其对SPF鸡脾淋巴细胞诱导产生γ-干扰素(IFN-γ)的活性和其对病毒的抑制效果;用3H-TdR掺入法和MTT法分别检测其对T淋巴细胞诱导转化和NK细胞杀伤活性的作用。结果表明,经诱导表达出分子量44kD的目的蛋白(与GST融合表达),纯化后得到去除菌体蛋白的高纯度目的蛋白;该蛋白能够诱导脾细胞产生IFN-γ,当浓度为250ng/mL时诱导IFN-γ的活性最高,可达1×106U/mL;但该蛋白不能直接抑制水疱性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上生长;能够刺激淋巴细胞显著增殖,浓度为250ng/mL时效果最佳;适当浓度的rChIL-18蛋白能促进NK细胞的杀伤活性,浓度为150ng/mL时,作用最强。利用原核表达的重组鸡白细胞介素-18蛋白与天然鸡IL-18蛋白一样具有较广泛的生物学活性。
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| 关 键 词： | 鸡白细胞介素-18 原核表达 纯化 生物学活性 |
| 文章编号： | 1006-1304（2007）01-0005-06 |
| 收稿时间： | 2006-01-11 |
| 修稿时间： | 2006-01-112006-03-30 |
Biological Activity Assay of Purified Expression Product of Recombined Chicken Interleukin-18 Gene in Escherichia coli |
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| LI Hong-mei,HU Jing-dong,MA Feng-long,ZHENG Yu-shu,LIU Cui-yan,TIAN Zhao-ju,ZHAO Hong-kun.Biological Activity Assay of Purified Expression Product of Recombined Chicken Interleukin-18 Gene in Escherichia coli[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(1):5-10. |
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| Authors: | LI Hong-mei HU Jing-dong MA Feng-long ZHENG Yu-shu LIU Cui-yan TIAN Zhao-ju ZHAO Hong-kun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | chicken IL-18 prokaryotic expression purification biological activity assay |
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