基于45S rDNA-FISH的异源三倍体‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂染色体行为追踪

【目的】利用FISH技术追踪三倍体‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂过程特定染色体的行为，明确其配对和分离规律，丰富对杨树异源三倍体减数分裂过程染色体行为的细胞遗传学认识。【方法】以三倍体‘银中杨’花药为材料，对不同酶液组合和酶解时间进行筛选，在此基础上均进行减数分裂染色体制片，以45S rDNA序列为探针，利用FISH技术，对‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂过程染色体行为进行追踪和分析。【结果】1)筛选出适于‘银中杨’小孢子母细胞减数分裂染色体制片的酶解条件为3%纤维素酶+1%果胶酶混合液在37℃下酶解3 h,结合压片和冷冻脱盖片，可获得细胞分散度良好，细胞质薄，背景干净，染色体形态清晰的制片，适用于FISH分析。2)45S rDNA探针信号定位于‘银中杨’3条同源染色体上，它们在中期I呈现III、II+I、I+I+I 3种配对形式，其中三价体发生的频率最高，达69.28%,II+I和I+I+I的配对类型分别占28.10%和2.61%,表明信号所定位的染色体亲缘关系可能较近，但也存在联会松弛的现象。3)约80.37%～93.44%的细胞在后期I至中期II发育阶段呈现2/1分离模式，约63....