| 青藏高原放牧家畜小肠结肠炎耶尔森氏菌LAMP检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 蔡其刚,唐一波,高小龙,仝丽娜,赵静,张红见. 青藏高原放牧家畜小肠结肠炎耶尔森氏菌LAMP检测方法的建立及应用[J]. 安徽农业科学, 2019, 47(24): 107-110 |
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| 作者姓名： | 蔡其刚 唐一波 高小龙 仝丽娜 赵静 张红见 |
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| 作者单位： | 青海大学畜牧兽医科学院,青海西宁,810016;青海大学农牧学院,青海西宁,810016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;青海省农牧厅项目;青海省农牧厅项目 |
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| 摘 要： | ![]()
为了建立特异性、敏感性和适用性强的LAMP检测方法,采用分子生物学方法,根据GenBank数据库中该细菌的outL基因,进行了多序列比对和保守区域确定。根据其保守序列,在线设计和筛选了一套LAMP引物。温度优化及特异性和敏感性验证后建立了检测该病菌的LAMP检测方法,并对青藏高原放牧牛、羊临床粪便样品进行了检测。结果表明,LAMP检测方法的最适温度为63℃;检测其与大肠杆菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌及蜡样芽胞杆菌无交叉反应;检测下限为100 fg目的基因;利用建立的方法检测了208份放牧牦牛、藏羊粪便DNA样品,共检测到26份阳性样品,阳性率为12.5%。这表明成功建立了一种检测该病的特异性、敏感性和适用性强的LAMP检测方法。
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| 关 键 词： | 放牧家畜 小肠结肠炎耶尔森氏菌 LAMP outL基因 敏感性 特异性 |
Establishment and Application of LAMP Detection Method for Yersinia enterocolitica in Grazing Livestock in Qinghai-Tibet Plateau |
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| Abstract: | ![]()
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