| 禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 徐倩,谢芝勋,谢丽基,罗思思,黄莉,黄娇玲,曾婷婷,谢志勤,邓显文.禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立[J].中国畜牧兽医,2014,41(11):58-62. |
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| 作者姓名： | 徐倩 谢芝勋 谢丽基 罗思思 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 谢志勤 邓显文 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学动物科技学院, 广西南宁 530004;2. 广西壮族自治区兽医研究所, 广西畜禽疫苗新技术重点实验室, 广西南宁 530001 |
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| 基金项目： | 广西特聘专家专项经费(2011B020);广西自然科学基金(2013GXNSFDA019015);广西科技攻关重大专项(1222003-2-4);桂渔牧科(14-1)。 |
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| 摘 要： | 为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313 bp (HA基因)、451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667 bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 H9亚型 N2亚型 M基因 三重PCR |
| 收稿时间： | 2014-07-18 |
Development of a Triplex RT-PCR Assay for Detection of Avian Influenza Virus H9N2 Subtype |
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| XU Qian,XIE Zhi-xun,XIE Li-ji,LUO Si-si,HUANG Li,HUANG Jiao-ling,ZENG Ting-ting,XIE Zhi-qin,DENG Xian-wen.Development of a Triplex RT-PCR Assay for Detection of Avian Influenza Virus H9N2 Subtype[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014,41(11):58-62. |
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| Authors: | XU Qian XIE Zhi-xun XIE Li-ji LUO Si-si HUANG Li HUANG Jiao-ling ZENG Ting-ting XIE Zhi-qin DENG Xian-wen |
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| Institution: | 1. College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, China;2. Guangxi Key Laboratory of Animal Vaccines and Diagnostics, Guangxi Veterinary Research Institute, Nanning 530001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avian influenza virus H9 subtype N2 subtype M gene triplex PCR |
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