| 犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库的构建 |
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| 引用本文： | 韩岩岩,宋德光.犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库的构建[J].中国畜牧兽医,2014,41(5):49-52. |
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| 作者姓名： | 韩岩岩 宋德光 |
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| 基金项目： | 贵州省科学技术基金（黔科合J字［2013］2313号）；2013 年遵义医学院博士启动基金（F-584）。 |
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| 摘 要： | 试验旨在筛选水泡性口炎病毒的受体，构建犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。通过用Trizol试剂提取犊牛口腔黏膜上皮细胞总RNA，然后分离和纯化mRNA，经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRⅠ/HindⅢ接头，然后用EcoRⅠ和Hind Ⅲ酶消化双链cDNA末端接头，使双链cDNA 2端含有EcoRⅠ和Hind Ⅲ黏性末端。所有处理后的双链cDNA，经Mini Column 纯化，收集400 bp以上的双链cDNA片段，将其连接带有EcoRⅠ和Hind Ⅲ末端的T7 Select 10-3b载体，经体外包装后，以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示文库。经测定未扩增文库的滴度为1.3×107 PFU/mL，重组率为95.8%，扩增后文库滴度为2.6×1010 PFU/mL。随机挑取100个噬菌斑进行PCR鉴定，95%的插入片段大于400 bp。结果表明成功构建了犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。
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| 收稿时间： | 2013-10-22 |
Construction of Calves Oral Mucosal Epithelial Cells T7 Phage Display Library |
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| HAN Yan-yan,SONG De-guang.Construction of Calves Oral Mucosal Epithelial Cells T7 Phage Display Library[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014,41(5):49-52. |
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| Authors: | HAN Yan-yan SONG De-guang |
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