| 牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达 |
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| 引用本文： | 郭设平,刘思国,王春来,邵美丽,宫强,刘建东.牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达[J].中国兽医科技,2005,35(12):946-949. |
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| 作者姓名： | 郭设平 刘思国 王春来 邵美丽 宫强 刘建东 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江哈尔滨150001 [2]中国农业科学院研究生院,北京100081 [3]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划项目（2002BA518A04） |
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| 摘 要： | 以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得mpb64和Ag85B两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术（SOE）剪接mpb64和Ag85B,得到融合基因mpb64-Ag85B;将融合基因片段先克隆于pMD 18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a（＋）中,得到重组质粒pET64-85.该重组质粒经核苷酸序列测定,显示其中的外源片段与期望的序列一致;其BL21（DE3）转化菌经IPTG诱导表达带有6个组氨酸标签的融合蛋白;用Ni2＋螯合层析方法纯化融合蛋白,Western-blotting分析结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应.
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| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 融合基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-6419（2005）12-0946-04 |
| 收稿时间： | 2005-08-12 |
Prokaryotic expression of fusion gene mpb64-Ag85B of Mycobacterium bovis in Escherichia coli |
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| GUO She-ping, LIU Si-guo, WANG Chun-lai, SHAO Mei-li, GONG Qiang, LIU Jian-dong.Prokaryotic expression of fusion gene mpb64-Ag85B of Mycobacterium bovis in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2005,35(12):946-949. |
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| Authors: | GUO She-ping LIU Si-guo WANG Chun-lai SHAO Mei-li GONG Qiang LIU Jian-dong |
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| Institution: | 1. Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001 ,China; 2. Graduate School, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081 ,China ; 3. College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium bovis fusion gene prokaryotic expression |
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