| 检测牛IL-4双抗体夹心ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱月姝,文志发,孔文君,徐正中,焦新安,陈祥.检测牛IL-4双抗体夹心ELISA方法的建立[J].扬州大学学报(农业与生命科学版),2023(3):65-71. |
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| 作者姓名： | 朱月姝 文志发 孔文君 徐正中 焦新安 陈祥 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;2. 扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目(2021YFD1800403)；;江苏省重点研发计划项目(BE2021331)；;江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(21)1004]；;江苏高等学校学科创新引智计划项目(D18007)； |
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| 摘 要： | 为利用牛白细胞介素-4 (BoIL-4)的特异性单克隆抗体(MAb)建立检测BoIL-4的双抗体夹心ELISA方法，以多种ELISA方法对7株抗BoIL-4的单抗进一步筛选，得到反应最佳的2株单抗8B7和4A10,以A9表达的重组BoIL-4为阻断剂的阻断ELISA试验中，表明这2株单抗也可识别所构建的细胞系A9表达的重组BoIL-4。以单抗8B7作为包被抗体，以标记了HRP的单抗4A10作为检测抗体建立的双抗体夹心ELISA方法可检测大肠埃希菌、毕赤酵母和Flp-In-293细胞系3种表达系统表达的重组BoIL-4,最低检测限分别为0.25、8和2 ng·mL-1,且对A9细胞系上清中表达的BoIL-4检测效果和特异性良好。该研究建立的BoIL-4双抗体夹心ELISA方法为深入研究BoIL-4、开发BoIL-4 ELISA检测试剂盒奠定了基础。
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| 关 键 词： | 检测牛白细胞介素-4 单克隆抗体 抗体夹心ELISA |
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