| 烟草PR3b转录后剪切元件NRSE1与GUS融合表达后的可变剪切 |
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| 作者姓名： | 赵雪 王锋 王文静 刘晓峰 卞士权 刘艳华 刘新民 杜咏梅 张忠锋 张洪博 |
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| 作者单位： | 1 中国农业科学院烟草研究所,山东青岛 2661012 西南大学农学与生物技术学院,重庆 400716 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31801279);中国农业科学院“青年英才计划”项目;中国农业科学院科技创新工程(ASTIP-TRIC05);中国烟草总公司云南省公司(2019530000241005);四川省公司项目(SCYC202014) |
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| 摘 要： | 【目的】烟草(Nicotiana tabacum L.)碱性几丁质酶基因PR3b在低烟碱突变体(nic1和nic2)中存在转录后mRNA可变剪切现象,但其可变剪切的发生机制仍不清楚。将PR3b的可变剪切元件NRSE1(nicotinesynthesis related splicing element 1)与GUS融合表达,分析NRSE1元件的独立可变剪切特性,以揭示其作用机制。【方法】利用PCR扩增方法获得PR3b cDNA序列中的NRSE1元件片段,并利用基因重组技术构建了烟草PR3b可变剪切元件NRSE1与GUS的融合表达载体。将融合表达载体导入农杆菌LBA4404后,通过农杆菌介导的叶盘转化法培育了表达NRSE1与GUS融合子的低烟碱突变体nic1和nic2及野生型烟草转基因植株;通过RT-PCR检测及GUS染色鉴定出阳性植株后,利用RT-PCR分析NRSE1与GUS融合表达后在低烟碱突变体和野生型烟草中的可变剪切特性;对转基因植株的幼苗进行乙烯(ET)和茉莉酸(JA)处理,通过GUS染色方法分析ET和JA处理对转基因植株中GUS活性的影响,并通过RT-PCR方法分析ET和JA...
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| 关 键 词： | 烟草 PR3b 低烟碱突变体 可变剪切 茉莉酸 乙烯 |
| 收稿时间： | 2019-09-05 |
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