| 利用免疫共沉淀技术研究RSVCP、SP和NSvc4蛋白的互作 |
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| 引用本文： | 鹿连明,秦梅玲,王萍,兰汉红,牛晓庆,谢荔岩,吴祖建,谢联辉.利用免疫共沉淀技术研究RSVCP、SP和NSvc4蛋白的互作[J].农业生物技术学报,2008,16(5). |
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| 作者姓名： | 鹿连明 秦梅玲 王萍 兰汉红 牛晓庆 谢荔岩 吴祖建 谢联辉 |
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| 作者单位： | 福建农林大学植物病毒研究所,福建省植物病毒学重点实验室,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，高等学校博士学科点专项科研项目，国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为了检测水稻条纹病毒(Rice sgipe virus,RSV)外壳蛋白(coat protein,CP)、病害特异蛋白(disease-special protein,SP)和可能的运动蛋白NSvc4自身和两两之间的互作关系,首先通过PCR扩增获得了分别融合有HA或c=Myc标签的RSV CP、SP和NSvc4基因,并将其插入到植物表达载体pEGAD或pKYLX71:35S2中.重组质粒转化根癌农杆菌(Agrobactctium tume-faciens)EHA105后,将含有不同重组质粒的根癌农杆菌菌液混合后注射烟草(Nicotiana benthamiana)叶片.提取烟草中瞬时表达的蛋白,以HA或c-Myc抗体进行免疫共沉淀试验,最后免疫混合物通过c-Myc抗体或HA抗体进行Western blot检测,确定蛋白的互作情况.结果表明,RSV CP蛋白自身能够发生互作,而CP与SP,CP与NSvc4,SP与SP,SP与NSvc4,及NSvc4与NSvc4蛋白之间均未有检测到互作现象.
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| 关 键 词： | 水稻条纹病毒 免疫共沉淀 蛋白互作 |
Studies on the Interactions between RSV CP, SP and NSvc4 Proteins Using Co-immunoprecipitation Technology |
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| LU Lian-ming,QIN Mei-ling,WANG Ping,LAN Han-hong,NIU Xiao-qing,XIE Li-yan,WU Zu-jian,XIE Lian-hui.Studies on the Interactions between RSV CP, SP and NSvc4 Proteins Using Co-immunoprecipitation Technology[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2008,16(5). |
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| Authors: | LU Lian-ming QIN Mei-ling WANG Ping LAN Han-hong NIU Xiao-qing XIE Li-yan WU Zu-jian XIE Lian-hui |
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