| 稻瘟菌蛋白激发子基因pemG1植物表达载体的构建及其转化烟草的研究 |
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| 引用本文： | 毛建军,曾洪梅,杨秀芬,袁京京,邱德文.稻瘟菌蛋白激发子基因pemG1植物表达载体的构建及其转化烟草的研究[J].分子植物育种,2008,6(3):419-424. |
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| 作者姓名： | 毛建军 曾洪梅 杨秀芬 袁京京 邱德文 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100081 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)
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国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 设计含MluⅠ酶切位点的接头,将其连接入经KpnⅠ和BamHⅠ酶切后的质粒pCAMBIA2300-U-bi-Ocs,得到pCAMBIA2300-Ubi-adaptor-Ocs。设计含有KpnⅠ和MluⅠ酶切位点的引物,以稻瘟菌基因组DNA为模板扩增得到pemG1序列。将其连接入pMD18-T得到pMD18-T-pemG1。最后,用KpnⅠ和MluⅠ从pMD18-T-pemG1切下pemG1基因片段,将其连接入pCAMBIA2300-Ubi-adaptor-Ocs的KpnⅠ-MluⅠ酶切位点,构建成稻瘟菌蛋白激发子基因pemG1的植物表达载体体pCAMBIA2300-Ubi-pemG1-Ocs。用冻融法将pCAMBIA2300-Ubi-pemG1-Ocs导入根癌农杆菌菌株AGL-1,再通过根癌农杆菌介导转化获得了转基因烟草株系。用PCR,Northern和Western杂交验证了pemG1基因在受体烟草基因组中的整合,转录和表达。此研究为下一步通过稻瘟菌蛋白激发子基因pemG1的表达来提高转基因烟草的抗病性打下了基础。
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| 关 键 词： | 烟草 蛋白激发子 植物表达载体 遗传转化 |
Construction of Plant Expression Vector for Elicitor-encoding Gene pemG1 from Magnaporthe grisea and its Transformation to Tabacco |
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| Mao Jianjun,Zeng Hongmei,Yang Xiufen,Yuan Jingjing,Qiu Dewen.Construction of Plant Expression Vector for Elicitor-encoding Gene pemG1 from Magnaporthe grisea and its Transformation to Tabacco[J].Molecular Plant Breeding,2008,6(3):419-424. |
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| Authors: | Mao Jianjun Zeng Hongmei Yang Xiufen Yuan Jingjing Qiu Dewen |
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| Institution: | Mao Jianjun Zeng Hongmei Yang Xiufen Yuan Jingjing Qiu Dewen The State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases , Insect Pests,Institute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing,100081 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tobacco Protein elicitor Plant expression vector Genetic transformation |
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