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脊椎动物源细胞因子对合浦珠母贝外套膜细胞培养及其矿化功能的影响
作者姓名:孔玮  李世国  谢莉萍  张荣庆
作者单位:清华大学生命科学学院, 北京 100084,清华大学生命科学学院, 北京 100084,清华大学生命科学学院, 北京 100084,清华大学生命科学学院, 北京 100084
基金项目:国家自然科学基金(31372502;31372508);国家重点基础研究发展计划(2010CB126405)
摘    要:筛选出能促进合浦珠母贝外套膜细胞培养及矿化功能的细胞因子,以作为优化本物种细胞培养基的参考,挑选三龄合浦珠母贝,获取其外套膜进行原代细胞培养。向各实验组细胞培养基中分别添加表皮生长因子(EGF)、内皮细胞生长添加剂(ECGS)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过比较细胞活性、贴壁能力、迁移能力和4种基质蛋白基因(pif80、n16、msi7及accbp)表达水平的变化,来评判这些因子对细胞培养及细胞矿化功能的影响。结果显示:(1)EGF能显著提高原代培养细胞的活性、贴壁能力和迁移能力,并促进pif80、n16和accbp基因的表达;(2)ECGS能增强细胞的贴壁能力和迁移能力,并大幅提高pif80、n16和msi7基因的表达水平;(3)IGF-1能显著增强细胞活性、贴壁能力、迁移能力和msi7的基因表达水平,但对pif80、n16和accbp基因的表达有一定抑制作用;(4)碱性成纤维细胞生长因子能增强细胞的活性及贴壁能力,并显著提升pif80、n16和accbp基因的表达水平。研究表明,脊椎动物源细胞因子具有延长细胞培养时间、增强细胞活性及促进矿化相关基因表达的作用,能够用于优化合浦珠母贝外套膜细胞的培养基。

关 键 词:合浦珠母贝  细胞因子  外套膜  细胞培养  细胞系
收稿时间:2015-03-25
修稿时间:2015-05-12
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