| 猪繁殖与呼吸综合症病毒结构蛋白GP5-M腺病毒载体的构建及其在山羊乳腺中的表达 |
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| 引用本文： | 兰 辉,卓伟伟,刘 军,罗 艳,权富生,华 松.猪繁殖与呼吸综合症病毒结构蛋白GP5-M腺病毒载体的构建及其在山羊乳腺中的表达[J].西北农业学报,2016,25(6):804-810. |
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| 作者姓名： | 兰 辉 卓伟伟 刘 军 罗 艳 权富生 华 松 |
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| 作者单位： | （西北农林科技大学 动物医学院，陕西杨凌 712100） |
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| 基金项目： | 国家高科技研究发展计划（2011AA100303）。 |
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| 摘 要： | 猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)是严重威胁养猪业的病毒性疾病,疫苗免疫是预防该病的最有效途径,PRRSV糖蛋白GP5和基质蛋白M融合后制成的基因工程疫苗能够有效激发机体产生免疫应答。通过在GP5和M基因的5′端依次加上组氨酸标签序列、信号肽序列,利用Linker(GP)序列将GP5和M基因连接构建融合表达GP5和M蛋白的重组质粒pMD18T-SignalP-His-GP5-M。以该质粒为模板,构建重组腺病毒载体并包装腺病毒。结果表明,用包装的腺病毒感染乳腺上皮细胞,测得最佳感染复数(MOI)为25,定量PCR和Western blot方法均检测到GP5-M的表达。大量扩增腺病毒并使用不连续氯化铯浓度梯度离心纯化病毒,使用纯化的病毒灌注山羊乳腺,采用Western blot在收集的乳汁中也检测到GP5-M蛋白的表达。结果证实,利用腺病毒载体作为基因转导的媒介,在山羊乳腺中可以表达GP5-M融合蛋白。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合症 腺病毒载体 GP5-M蛋白 山羊乳腺 |
Construction of PRRS GP5-M Adenovirus Vector and Its Expression in Goat Mammary Gland |
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| LAN Hui,ZHUO Weiwei,LIU Jun,LUO Yan,QUAN Fusheng and HUA Song.Construction of PRRS GP5-M Adenovirus Vector and Its Expression in Goat Mammary Gland[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2016,25(6):804-810. |
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| Authors: | LAN Hui ZHUO Weiwei LIU Jun LUO Yan QUAN Fusheng and HUA Song |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS) Adenovirus vector GP5-M protein Goat mammary |
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