| 拟黑多刺蚁hsp90基因的RNA干扰及其对EcR和USP基因mRNA表达的影响 |
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| 引用本文： | 樊瑾瑛,应琼琼,党 亮,等.拟黑多刺蚁hsp90基因的RNA干扰及其对EcR和USP基因mRNA表达的影响[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(4):191-196. |
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| 作者姓名： | 樊瑾瑛 应琼琼 党 亮 等 |
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| 作者单位： | 陕西师范大学 生命科学学院，动物生殖与发育实验室,陕西师范大学 生命科学学院，动物生殖与发育实验室,陕西师范大学 生命科学学院，动物生殖与发育实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（31171195） |
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| 摘 要： | 【目的】对拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger)成虫热激蛋白90(Heat shock protein 90,HSP90)基因进行RNA干扰(RNAi),为分析hsp90基因的功能及将RNAi技术用于害虫防治提供参考。【方法】采用Trizol法提取拟黑多刺蚁总RNA,反转录合成cDNA第一链用于hsp90基因的克隆。利用T7RiboMAXTM Express RNAi System将hsp90合成双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA),将其配制成120,60,30,15和7.5ng/μL的溶液饲喂拟黑多刺蚁雌蚁、雄蚁和工蚁成虫进行RNAi,共饲喂14d,记录成虫死亡率,确定dsRNA最适质量浓度,并以此剂量对各品级成虫进行干扰,通过荧光实时定量PCR,检测干扰效果及干扰hsp90基因对EcR、USP mRNA表达的影响。【结果】成功获得拟黑多刺蚁hsp90基因片段,其长度523bp,并合成了dsRNA。饲喂dsRNA后发现,dsRNA质量浓度越大,拟黑多刺蚁死亡率越高,在dsRNA质量浓度为120ng/μL时,饲喂5d后成虫全部死亡;30ng/μL是dsRNA干扰的最适质量浓度。以30ng/μL dsRNA干扰后,荧光实时定量PCR结果表明,拟黑多刺蚁每个品级成虫hsp90基因mRNA均被沉默。hsp90基因被干扰后,EcR的表达没有显著变化,USP的表达显著降低。【结论】采用饲喂法成功干扰了拟黑多刺蚁hsp90基因mRNA的表达;hsp90基因与USP基因表达有一定的相关性。
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| 关 键 词： | 热激蛋白90基因 RNA干扰 蜕皮激素受体 超气孔蛋白 |
| 收稿时间： | 2013/10/22 0:00:00 |
RNA interference effect of hsp90 gene and impacting on the mRNA expression of EcR and USP genes in Polyrhachis vicina Roger |
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| FAN Jin-ying,YING Qiong-qiong and DANG Liang,et al.RNA interference effect of hsp90 gene and impacting on the mRNA expression of EcR and USP genes in Polyrhachis vicina Roger[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(4):191-196. |
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| Authors: | FAN Jin-ying YING Qiong-qiong and DANG Liang |
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| Institution: | FAN Jin-ying;YING Qiong-qiong;DANG Liang;XI Geng-si;Laboratory of Animal Reproduction and Development,College of Life Science,Shaanxi Normal University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | heat shock protein 90 gene RNA interference ecdysone receptor ultraspiracle protein |
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