| 苏云金杆菌Cry2Ab可溶蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 邵恩斯,林莉,关雄.苏云金杆菌Cry2Ab可溶蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J].农业生物技术学报,2013,21(1):106-111. |
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| 作者姓名： | 邵恩斯 林莉 关雄 |
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| 作者单位： | 福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，高等学校博士学科点专项科研基金，福建省科技厅产学研重点项目 |
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| 摘 要： | 苏云金杆菌Cry2Ab蛋白是一类对鳞翅目昆虫有特异性毒性作用的毒素蛋白,已广泛应用于针对鳞翅目害虫的防治之中。依据苏云金杆菌cry2Ab基因序列设计一对全长引物,从苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)WB9菌株总DNA中克隆出cry2Ab基因全序列,构建Cry2Ab-PK表达载体,将获得的Cry2Ab-PK阳性克隆进行原核诱导表达,获得约90kD的Cry2Ab-GST融合蛋白,经批量纯化并切除GST标签后获得可溶Cry2Ab蛋白,约65kD。利用纯化Cry2Ab可溶蛋白免疫新西兰雄性大白兔(Oryctolagus cuniculus),制备Cry2Ab兔源多克隆抗血清,通过间接ELISA法测定Cry2Ab抗血清效价超过1:150000。Western blot测定结果表明,制备的Cry2Ab兔源抗血清能特异性识别Cry2Aa及Cry2Ab抗原蛋白,不能识别Cry1Ab及Cry3Aa抗原蛋白。研究结果对深入研究Cry2A毒素蛋白作用机理及毒素与受体间互作关系提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 苏云金杆菌 Cry2Ab 可溶蛋白 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression of the Soluble Cry2Ab Protein from Bacillus thuringiensis and Preparation of the Polyclonal Antibody Against Cry2Ab |
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| SHAO En-Si
,
LIN Li
,
GUAN Xiong.Prokaryotic Expression of the Soluble Cry2Ab Protein from Bacillus thuringiensis and Preparation of the Polyclonal Antibody Against Cry2Ab[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2013,21(1):106-111. |
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| Authors: | SHAO En-Si LIN Li GUAN Xiong |
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| Institution: | Key Laboratory of Bio-pesticide and Chemical Biology,Ministry of Education,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China |
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