17β-雌二醇和曲洛斯坦对大口黑鲈生长及性腺发育的影响

为获得大口黑鲈（Micropterussalmoides）雌性化逆转的最适参数,建立伪雌鱼性别诱导和全雄苗种创制技术,采用15日龄（daysposthatching,dph）且体长为（1.00±0.01）cm的大口黑鲈幼鱼为实验对象,投喂拌有17β-雌二醇（17β-estradiol,17β-E₂）或曲洛斯坦（trilostane,TR）的人工配合饲料,3个实验组饲料分别含有30mg/kg17β-E₂、30 mg/kg TR和20 mg/kg 17β-E₂+10 mg/kg TR （依次命名为E30、TR30和E₂0TR10）,对照组饲料不含17β-E₂和TR（命名为C）, 60 d后停止投喂外源激素,分析饲喂17β-E₂和TR对大口黑鲈生长性能、雌性比例、性腺发育的影响;12月龄时,采集各实验组伪雌鱼和对照组雌雄鱼血液和性腺组织,检测性类固醇类激素含量、dmrt1和cyp19a1a基因表达水平及卵巢发育形态。结果表明,饲喂外源雌性激素60 d后, E30和E₂0TR10组的体长和体重显著低于C组（P<0.05）,TR30组的体长和体重高于对照组但无显著差异（P>0.05）,E30、TR30和E₂0TR10组雌性比例分别为100.00%、0%、100.00%,C组雌性比例为53.33%;性腺组织切片结果显示,C组卵巢有大量初级卵母细胞,E30和E₂0TR10组遗传雄鱼出现卵巢腔、卵原细胞和卵母细胞,而TR30组雄鱼未发生性逆转; 12月龄时,各实验组伪雌鱼比例未发生变化,C组雌性比例为46.67%;E30和E₂0TR10组伪雌鱼的卵巢发育迟滞,处于II期;此外,E30和E₂0TR10组伪雌鱼血清中雌二醇（estradilol,E₂）含量显著高于对照组雄鱼（P<0.05）,TR30组低于对照组雄鱼,但无显著差异（P>0.05）,各实验组血清中睾酮（testosterone,T）含量显著高于对照组雌鱼（P<0.05）。与对照组雄鱼相比,E30和E₂0TR10组伪雌鱼cyp19a1a表达量显著上调（P<0.05）,dmrt1表达量显著下调（P<0.05）。综上所述,本研究投喂30 mg/kg TR未获得伪雌鱼,而投喂30 mg/kg 17β-E₂和20 mg/kg 17β-E₂+10 mg/kg TR实验组均可获得大口黑鲈伪雌鱼。12月龄伪雌鱼卵巢处于II期,血清中E₂含量及卵巢中cyp19a1a表达量均未到达正常雌鱼水平,导致卵巢发育迟滞。