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琯溪蜜柚汁胞APX1 cDNA的克隆及原核表达
引用本文:钟凤林,郭志雄,潘东明,李开拓.琯溪蜜柚汁胞APX1 cDNA的克隆及原核表达[J].热带作物学报,2010,31(1):76-82.
作者姓名:钟凤林  郭志雄  潘东明  李开拓
作者单位:1. 福建农林大学园艺学院,福建福州,350002
2. 福建农林大学园艺学院,福建福州,350002;福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所,福建福州,350002
基金项目:国家科技支撑计划项目"台湾农业新品种、新技术引进创新研究与示范" 
摘    要:为了解琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞在发育过程中,APX与汁胞活性氧自由基清除和汁胞粒化的关系,以琯溪蜜柚果肉为材料,运用cDNA克隆的方法,克隆得到琯溪蜜柚果肉APX1cDNA全长,并进行了原核表达。结果表明:获得了全长为1118bp的琯溪蜜柚汁胞APX1cDNA全序列,包含753bp的开放阅读框,编码250个通读的氨基酸序列。具有过氧化物酶活性位点信号和亚铁血红素结合基信号。目前APX1cDNA序列已在GenBank上注册,登录号为gb|FJ595794.1。通过构建重组质粒p32-APX1,转化至TransRosetta(DE3)中,在大肠杆菌宿主中获得了表达,从而为下一步制备该酶抗体及研究琯溪蜜柚汁胞粒化过程中APX1的功能奠定了基础。

关 键 词:琯溪蜜柚  序列分析  原核表达

Prokaryotic Expression of APX1 cDNA Cloned from Juice Sacs of Citrus grandis(L.) Osbeck
Zhong Fenglin,Guo Zhixiong,Pan Dongming and Li Kaituo.Prokaryotic Expression of APX1 cDNA Cloned from Juice Sacs of Citrus grandis(L.) Osbeck[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2010,31(1):76-82.
Authors:Zhong Fenglin  Guo Zhixiong  Pan Dongming and Li Kaituo
Institution:Zhong Fenglin1,Guo Zhixiong1,Pan Dongming1,2,Li Kaituo1,2 1 College of Horticulture,Fujian Agriculture , Forestry University,Fuzhou 350002,2 Institute of Postharvest H,ling , Storage of Horticultural Crops
Abstract:In order to understand the relation of ascorbate peroxidase(APX) with active oxygen free radical scavenge and granulation of juicy sacs of pummelo 'Guanximiyou'(Citrus grandis(L.) Osbeck'Guanximiyou') at different development stages, total RNA of juice sacs of pomelo 'Guanximiyou'was extracted, and conserved region of APX cDNA was obtained by degenerated oligo nucleotide primed RT-PCR. Rapid amplification of cDNA ends (RACE) was performed to the 3' and 5' direction, and full-length cDNA encoding APX1 was ob...
Keywords:APX1  cDNA  pummelo  APX1  cDNA  sequencing analysis  prokaryotic expression
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