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木奈果实中花青素合成酶基因PsANS的克隆及原核表达分析
引用本文:姜翠翠,陈桂信,潘东明,吕恃衡.木奈果实中花青素合成酶基因PsANS的克隆及原核表达分析[J].热带作物学报,2011,32(11):2088-2093.
作者姓名:姜翠翠  陈桂信  潘东明  吕恃衡
作者单位:福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所;福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所;福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所;福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所
基金项目:国家科技支撑计划(No. 2007BAD07B00);校科技发展金(No. 2009068);福建省教育厅基金(No. JA10108)。
摘    要:根据NCBI数据库中已知的蔷薇科植物花青素合成酶基因序列设计特异引物,从本实验室已经构建好的木奈成熟果实均一化全长cDNA文库中筛选分离得到了一个编码花青素合成酶的cDNA:基因命名为PsANS,登录号:JN560957。该cDNA长1 478 bp,包含137 bp 5’非编码区,267 bp 3’非编码区,开放阅读框长度为1 074 bp。PsANS编码358个氨基酸,分子量为40.41 ku,理论等电点为5.35。经BLAST分析对比发现,PsANS氨基酸序列与甜樱桃、苹果和草莓的ANS氨基酸同源性都很高,分别为98%、93%和89%。将PsANS亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1和pET-32a上,在大肠杆菌BL21中经1mmol/L ITPG诱导表达获得了木奈PsANS融合表达蛋白,其分子量大小与预期的一致,进一步确认本试验克隆得到的PsANS为木奈花青素合成酶基因。

关 键 词:木奈  花青素合成酶  克隆  原核表达

Identification and Prokaryotic Expression of Anthocyanidin Synthase Gene in Prunus salicina
JIANG Cuicui,CHEN Guixin,PAN Dongming and LV Shiheng.Identification and Prokaryotic Expression of Anthocyanidin Synthase Gene in Prunus salicina[J].Chinese Journal of Tropical Crops,2011,32(11):2088-2093.
Authors:JIANG Cuicui  CHEN Guixin  PAN Dongming and LV Shiheng
Institution:Institute of Storage Scienci and Technology of Horticultural Products;Institute of Storage Scienci and Technology of Horticultural Products;Institute of Storage Scienci and Technology of Horticultural Products;Institute of Storage Scienci and Technology of Horticultural Products
Abstract:
Keywords:
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