| phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析 |
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| 引用本文： | 王玉华,吴忠义,张秀海,王永勤,黄丛林,贾敬芬.phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析[J].作物学报,2009,35(11):1949-1957. |
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| 作者姓名： | 王玉华 吴忠义 张秀海 王永勤 黄丛林 贾敬芬 |
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| 作者单位： | 1西北大学生命科学学院/陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室，陕西西安710069；2北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心，北京100097 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金项目，北京市自然科学基金项目，陕西省教育厅自然科学专项 |
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| 摘 要： | 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs, mcl-PHAs) 属于微生物聚酯。羟酰-CoA-ACP-转移酶和II型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶。将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接构建表达盒RpsbA-pro-phaG-RpsbA-ter，将II型PHA合酶的基因phaC与水稻叶绿体16S rRNA基因的强启动子Prrn及rbcL基因的终止子连接构建表达盒prrn-phaC-RrbcL-ter，连同壮观霉素抗性基因aadA表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter一起克隆进烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和accD之间，得到烟草叶绿体表达载体pTGC。用包裹有质粒pTGC的金粉子弹轰击烟草无菌苗叶片，经壮观霉素筛选后获得6株叶绿体型转基因植株。对T0代和T1代转基因植株进行PCR检测和Southern blot分析表明，外源基因已整合进烟草叶绿体基因组中，且T1代转基因植株已同质化。RT-PCR分析结果证实外源基因已在转录水平上表达。转基因植株的自交及正反交结果表明，外源基因在转基因后代中能够稳定遗传，遗传方式遵循母性遗传规律，不存在转基因的花粉漂移现象。
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| 关 键 词： | 烟草 叶绿体转化 phaG和phaC 遗传分析 |
| 收稿时间： | 2009-04-14 |
Transformation of phaG and phaC Genes into Tobacco Chloroplast Genome and Genetic Analysis |
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| WANG Yu-Hua,WU Zhong-Yi,ZHANG Xiu-Hai,WANG Yong-Qin,HUANG Cong-Lin,JIA Jing-Fen.Transformation of phaG and phaC Genes into Tobacco Chloroplast Genome and Genetic Analysis[J].Acta Agronomica Sinica,2009,35(11):1949-1957. |
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| Authors: | WANG Yu-Hua WU Zhong-Yi ZHANG Xiu-Hai WANG Yong-Qin HUANG Cong-Lin JIA Jing-Fen |
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| Institution: | 1.College of Life Sciences,Northwest University/Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology/Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Westem China,Xi'an 710069,China;2.Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tobacco Chloroplast genetic transformation phaG and phaC Maternally inheritance Genetic analysis |
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