| 鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5片段的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 孙兆增,张玉静,展德文,张艳宇,连继勤. 鼠层粘蛋白α5链E3、LG4、LG5片段的克隆及表达[J]. 中国兽医学报, 2004, 24(5): 467-469 |
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| 作者姓名： | 孙兆增 张玉静 展德文 张艳宇 连继勤 |
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| 作者单位： | 解放军军需大学,军事兽医系,吉林,长春,130062 |
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| 基金项目： | 瑞典隆得大学合作项目资助 |
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| 摘 要： | 从鼠的肝脏组织中提取总 RNA,采用 RT- PCR获得了鼠层粘蛋白 ( laminin)α5链的 E3 ( L G4 - 5)、L G4 和 L G5等 3个基因片段 ,与 NCBI数据库参考序列相比 ,同源性在 99%以上。将 E3 ( L G4 ,5)、L G4 和 L G5定向克隆到原核高效表达载体 Pet- 2 8a中 ,构建 Pet- 2 8a- E3 、Pet- 2 8a- L G4 、Pet- 2 8a- L G5等 3个原核表达质粒。将表达质粒转化表达受体菌 BL2 1中 ,IPTG诱导表达。收集菌液进行 SDS- PAGE电泳、Western- blotting分析 ,结果显示 ,这 3段基因在原核细胞中成功表达 ,薄层扫描显示表达蛋白占细胞总蛋白的 2 0 %以上。大量提取包涵体 ,纯化后免疫家兔 ,8周后得多克隆抗体 ,间接 EL ISA在抗体稀释到 1∶ 1 2 80 0时仍为阳性
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| 关 键 词： | 层粘蛋白 E3片段 鼠 表达 |
| 文章编号： | 1005-4545(2004)05-0467-03 |
| 修稿时间： | 2003-05-03 |
Cloning and Expression of LG4、LG5 and E3 Fragment of Mouse Laminin alpha 5 Chain |
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| SUN Zhao-zeng,ZHANG Yu-jing,ZHAN De-wen,ZHANG Yan-yu,LIAN Ji-qin. Cloning and Expression of LG4、LG5 and E3 Fragment of Mouse Laminin alpha 5 Chain[J]. Chinese Journal of Veterinary Science, 2004, 24(5): 467-469 |
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| Authors: | SUN Zhao-zeng ZHANG Yu-jing ZHAN De-wen ZHANG Yan-yu LIAN Ji-qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | laminin E_3 fragment mouse expression |
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