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基于免培养技术的食用菌病害微生物rDNA测序及初步分析
引用本文:高能,姚强,宫志远,郭立忠,万鲁长,任鹏飞,韩建东,黄春燕.基于免培养技术的食用菌病害微生物rDNA测序及初步分析[J].山东农业科学,2013(6).
作者姓名:高能  姚强  宫志远  郭立忠  万鲁长  任鹏飞  韩建东  黄春燕
作者单位:青岛农业大学/山东省应用真菌省级重点实验室;山东省农业科学院农业资源与环境研究所;
基金项目:国家食用菌产业技术体系建设项目(CARS-24);山东省农业良种工程项目(2011LZ006-04);山东省科技发展计划项目“基于宏基因组高通量测序的平菇病害快速检测与监测技术及相关基因的研究”
摘    要:采用CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒法提取四种主要食用菌病害组织样品的宏基因组DNA,用16S rDNA和18S rDNA通用引物分别对样品的基因组DNA进行PCR扩增、连接、转化并进行单克隆测序。每对引物随机挑取20个阳性克隆的rDNA序列进行比对,并对病害微生物的亲缘关系进行了初步分析,结果表明四种病害样品中两种为细菌性病害,两种为真菌性病害。

关 键 词:免培养  食用菌病害  rDNA序列分析

rDNA Sequencing and Analysis of Edible Fungus Disease Microorganisms Using Culture-Independent Method
Abstract:The microorganism metagenome of four kinds of edible fungus diseases was extracted by CTAB method combined with DNA gel recovery kit.The genomic DNA was amplified respectively by polymerase chain reaction using the universal primers of the 16S rDNA and 18S rDNA gene,and then monoclonal sequenced after ligated and transformed.At least 20 positive clones selected by random of each pair of primers were performed sequence alignment.The results showed that there were two bacterial diseases and two fungal diseases in the samples.
Keywords:Non-culture  Edible fungus disease  rDNA sequence analysis
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