高质量杨树粗线期染色体制片及荧光原位杂交

以美洲黑杨无性系‘哈佛杨’处于减数分裂粗线期的花药为研究材料,比较了蒸汽滴片法、涂片法、压片法及改良压片法4种不同制片方法,在制备美洲黑杨粗线期染色体中的差异,以期获得高质量的美洲黑杨粗线期染色体制片。结果表明:改良压片法是获得高质量美洲黑杨粗线期染色体的有效方法,获得的染色体制片背景干净,染色体形态良好,适于进一步荧光原位杂交研究。以拟南芥端粒序列为探针,采用缺刻平移法用地高辛标记探针DNA,杂交后信号用Rodamine anit-DIG-sheep抗体检测,建立了高效的荧光原位杂交技术体系。为进一步开展杨树的分子细胞遗传学研究奠定基础。