| 甘薯病毒病害(SPVD)的多重RT-PCR检测方法及其应用 |
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| 作者姓名： | 张盼 兰新芝 乔奇 张德胜 秦艳红 田雨婷 王爽 张振臣 |
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| 作者单位： | 1. 河南省农业科学院植物保护研究所,郑州 450002;河南省农作物病虫害防治重点实验室,郑州450002
2. 河南省新县农业局植保站,新县,465500 |
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| 基金项目： | 国家甘薯产业技术体系建设项目 |
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| 摘 要： | 根据甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)热激蛋白(Hsp70)基因和甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了4对引物,以单-RT-PCR反应体系为基础,分别对影响多重RT-PCR扩增的退火温度、Taq DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、引物浓度等条件进行了优化,建立了能同时检测SPVD两种病原的多重RT-PCR方法.该方法能有效区分SPFMV的主要株系类型.灵敏性试验表明,建立的多重RT-PCR方法对SPFMV-CH2、SPFMV-CH和SPCSV的最低检测浓度分别为1.42×104、1.32×104拷贝/μL和2.47×104拷贝/μL.该方法可用于甘薯叶片和薯块中病毒的检测,为SPVD的监测预警提供了一个有用的工具.
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| 关 键 词： | 甘薯病毒病害 甘薯羽状斑驳病毒 甘薯褪绿矮化病毒 多重RT-PCR |
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