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甘蓝枯萎病菌REMI转化体系的建立
引用本文:冯建海,张玮,李兴红,燕继晔,黄金光,. 甘蓝枯萎病菌REMI转化体系的建立[J]. 植物保护, 2013, 39(3): 101-104
作者姓名:冯建海  张玮  李兴红  燕继晔  黄金光  
作者单位:1. 青岛农业大学农学与植物保护学院,青岛,266109
2. 北京市农林科学院植物保护环境保护研究所,北京,100097
3. 青岛农业大学农学与植物保护学院,青岛 266109;山东省植物病虫害综合防控重点实验室,青岛266109
基金项目:公益性行业(农业)科研专项,北京市农林科学院植保环保所创新基金,山东省"泰山学者"建设工程专项经费;青岛农业大学高层次人才科研基金
摘    要:建立高效、稳定的甘蓝枯萎病菌REMI转化体系,为进一步获得特定表型突变体及基因功能研究建立技术储备.利用REMI(restriction enzyme mediate intergration)转化方法,将线性化的含有潮霉素抗性基因的pUCAT-PH质粒转化甘蓝枯萎病菌A6菌株的原生质体,摸索获得转化子最适的潮霉素筛选浓度以及不同限制性内切酶和酶量对转化效率的影响;利用PCR(polymerase chain reaction)技术对潮霉素抗性转化子进行验证.结果表明转化子的最适潮霉素筛选浓度为50 μg/mL;转化效率较高的限制性内切酶为HindⅢ,并且转化效率最高时的酶量为20 U.利用该转化体系构建了含1 050个转化子的甘蓝枯萎病菌转化子库,对转化子进行Southern验证,证明该转化体系是可行的.

关 键 词:甘蓝枯萎病菌  REMI  转化子库
收稿时间:2014-04-18
修稿时间:2014-09-11

Construction of transformation system in Fusarium oxysporum f.sp.conglutinans by REMI
Feng Jianhai , Zhang Wei , Li Xinghong , Yan Jiye , Huang Jinguang. Construction of transformation system in Fusarium oxysporum f.sp.conglutinans by REMI[J]. Plant Protection, 2013, 39(3): 101-104
Authors:Feng Jianhai    Zhang Wei    Li Xinghong    Yan Jiye    Huang Jinguang
Abstract:
Keywords:Fusarium oxysporum f.sp. conglutinans  REMI  transformants library
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