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| 正交设计优化大豆SSR-PCR反应体系及引物筛选 | |
| 引用本文： | 苏辉,李志刚,宋书宏. 正交设计优化大豆SSR-PCR反应体系及引物筛选[J]. 华北农学报, 2009, 24(2) |
| 作者姓名： | 苏辉 李志刚 宋书宏 |
| 作者单位： | 1. 内蒙古民族大学,农学院,内蒙古,通辽,028042 2. 辽宁省农业科学院,辽宁,沈阳,110161 |
| 基金项目： | 内蒙古教育厅资助项目 |
| 摘 要： | 以大豆(Glycine max L.)为材料,研究了PCR反应体系的主要成分对大豆SSR扩增结果的影响,并确定影响SSR扩增结果的各因素的最佳用量.以CTAB法提取的大豆叶片DNA为模板,应用L16(44)正交设计对影响大豆SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适合大豆SSR-PCR反应的最佳体系.结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响.大豆SSR-PCR优化反应体系为:2.0 μL 10×PCR Buffer,30 ng模板DNA,150μmol/L dNTP,0.4 μmol/LSSR引物,1.5 U Taq DNA聚合酶,2.0 mmoL/L Mg2+,加ddH2O至终体积20.0μL.优化的PCR扩增程序为:94℃预变性5 min.94℃变性30 s,50℃退火1 min,72℃延伸1 min,共35个循环,72℃延伸5 min,4℃保存.同时选用200对大豆引物对2份材料进行扩增,筛选出条带清晰,多态性好的引物74对,用于大豆SSR标记的进一步研究. |
| 关 键 词： | 大豆 正交设计 体系优化 引物筛选 |
Optimization of SSR-PCR System on Soybean by Orthogonal Design and SSR Primer Selection |
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| SU Hui,LI Zhi-gang,SONG Shu-hong. Optimization of SSR-PCR System on Soybean by Orthogonal Design and SSR Primer Selection[J]. Acta Agriculturae Boreali-Sinica, 2009, 24(2) | |
| Authors: | SU Hui LI Zhi-gang SONG Shu-hong |
| Affiliation: | 1.College of Agronomy;Inner Mongolia University for Nationalities;Tongliao 028042;China;2.Liaoning Academy of Agriculture Sciences;Shenyang 110161;China |
| Abstract: | |
| Keywords: | SSR-PCR |
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