| 环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表＊达 |
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| 引用本文： | 罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏.环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表＊达[J].西南农业大学学报,2008,30(10). |
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| 作者姓名： | 罗恒 王和勇 向阳 唐亮 谈立松 周彩存 孙敏 |
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| 作者单位： | [1]同济大学附属上海市肺科医院药剂科,上海200433 [2]同济大学附属上海市肺科医院肺癌免疫研究室,上海200433 [3]西南大学生命科学学院,重庆400715 |
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| 摘 要： | 构建了环氧合酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）的DNA疫苗载体pVAX1-COX-2,并考察在COS-7细胞中表达.用RT-PCR法从肺癌A549细胞中获得环氧合酶-2基因片段,此片段插入pVAX1载体构建pVAX1-COX-2真核重组表达质粒,脂质体介导法转染COS-7细胞,以pVAX1为对照,收集稳定转染细胞,利用RT-PCR和West-ern-blot分别在mRNA和蛋白水平上考察COX-2表达.实验结果表明：RT-PCR法从A549细胞mRNA中扩增1.8 kb的COX-2基因片段,酶切与测序结果表明所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2与预期相符,质脂体法成功地将质粒DNA转染到COS-7细胞中.RT-PCR和Western-blot分析结果表明COX-2已表达.因此,所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2正确,且在COS-7细胞中表达.
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| 关 键 词： | 环氧合酶-2 DNA疫苗 真核表达 COS-7细胞株 |
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