| 安淮山羊骨骼肌卫星细胞的分离培养与鉴定 |
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| 作者姓名： | 郑琪 睢梦华 朱龙 吴昊 丁建平 张运海 凌英会 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,合肥230036;安徽农业大学动物科技学院,合肥230036;安徽地方畜禽遗传资源保护与生物育种省级实验室,合肥230036;安徽省羊繁育工程技术研究中心,合肥230036 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学基金项目（1708085MC61）和安徽省现代农业产业技术体系（2016-2020）共同资助。 |
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| 摘 要： | 为了分离得到安淮山羊骨骼肌卫星细胞,成功构建山羊骨骼肌卫星细胞系,为相关研究提供实验材料。以安淮山羊背最长肌肌肉组织为材料,采取胶原酶和胰蛋白酶结合的二步消化法,结合差速贴壁法纯化原代骨骼肌卫星细胞。对骨骼肌卫星细胞中特异性基因Pax7用免疫荧光染色法及PCR扩增加以鉴定。通过分离、纯化,得到纯度较高的山羊骨骼肌卫星细胞,其形态为圆形,折光性强。培养一段时间后密度增大,细胞呈梭型。所得骨骼肌卫星细胞生长状态良好,具有较为一致的生长方式和形态特点。经免疫荧光染色法以及PCR鉴定发现细胞系中有Pax7基因的表达。通过上述材料和方法,可获得较纯的山羊骨骼肌卫星细胞,并稳定传代。
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| 关 键 词： | 山羊 骨骼肌卫星细胞 细胞分离 体外培养 免疫荧光染色 |
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