| 侵染西瓜的5种病毒ZYMV、WMV、TMV、SqMV和CMV的多重RT-PCR检测体系的建立与检测应用 |
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| 引用本文： | 王威麟,张昊,于祥泉,吴云锋,张文波,张春平.侵染西瓜的5种病毒ZYMV、WMV、TMV、SqMV和CMV的多重RT-PCR检测体系的建立与检测应用[J].植物病理学报,2010,40(1):27-32. |
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| 作者姓名： | 王威麟 张昊 于祥泉 吴云锋 张文波 张春平 |
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| 作者单位： | 1 西北农林科技大学植物保护学院 陕西省农业分子生物学重点实验室, 杨凌 712100;2 西安市农业技术推广中心, 西安 710061 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，西安市科技计划项目，教育部长江学者和创新团队发展计划，高等学校学科创新引智计划 |
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| 摘 要： | 根据5种病毒小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的核苷酸保守区序列,设计特异性引物对,从影响多重RT-PCR (mRT-PCR)扩增的引物浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行反应体系的优化,建立了一种能够同时检测ZYMV、WMV、TMV、SqMV和CMV的多重RT-PCR技术体系,并进行了实际应用。在一个体系中对上述5种病毒复合侵染的西瓜材料进行多重RT-PCR扩增,得到与试验设计相符的5条特异性条带,依次是542、485、410、354和293bp。该体系实现了对侵染西瓜的5种病毒的同时检测,极大地提高了检测效率,降低了检测成本,体现了多重RT-PCR的优越性。
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| 关 键 词： | 西瓜 多重RT-PCR 检测 病毒 |
| 收稿时间： | 2009-05-06 |
Establishment and application of multiplex RT-PCR for simultaneous detection of five watermelon viruses ZYMV,WMV,TMV,SqMV and CMV |
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| WANG Wei-lin,ZHANG Hao,YU Xiang-quan,WU Yun-feng,ZHANG Wen-bo,ZHANG Chun-ping.Establishment and application of multiplex RT-PCR for simultaneous detection of five watermelon viruses ZYMV,WMV,TMV,SqMV and CMV[J].Acta Phytopathologica Sinica,2010,40(1):27-32. |
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| Authors: | WANG Wei-lin ZHANG Hao YU Xiang-quan WU Yun-feng ZHANG Wen-bo ZHANG Chun-ping |
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| Institution: | 1 College of Plant Protection and Key Laboratory of Molecular Biology for Agriculture, Northwest Agricultural and Forestry University, Yang-ling 712100, China;2 Center for Popularizing Agricultural Technique, Xi'an 710061, China |
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| Abstract: | A multiplex RT-PCR(mRT-PCR) system was established for simultaneous detection on Zucchini yellow mosaic virus(ZYMV),Watermelon mosaic virus(WMV),Tobacco mosaic virus(TMV),Squash mo-saic virus(SqMV)and Cucumber mosaic virus(CMV)infected watermelon by using five sets of specific primers designed on the basis of conserved sequences of the 5 viruses. The concentrations of the primers, Mg2+,Taq DNA polymerase and dNTPs were examined and the PCR conditions including annealing temperature and amplification cycles ... |
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| Keywords: | watermelon multiplex RT-PCR detection virus |
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