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双抗体夹心ELISA检测排泄物PEDV
引用本文:李一经,刘博,姜艳平,崔文,唐丽杰,乔薪瑗,刘敏. 双抗体夹心ELISA检测排泄物PEDV[J]. 东北农业大学学报, 2015, 0(2)
作者姓名:李一经  刘博  姜艳平  崔文  唐丽杰  乔薪瑗  刘敏
作者单位:东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030
基金项目:科技部863计划项目(2012AA101304-3);黑龙江省高校科技创新基金
摘    要:用蔗糖密度梯度离心法纯化猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术获得2株分泌抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)单克隆抗体,建立检测PEDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该双抗体夹心ELISA最佳反应条件为,兔抗PEDV抗体稀释度为1:800包被37℃1 h加4℃12 h,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1:2 000作用45 min,以OD490nm≥0.37作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,最低检测限为5×103.67TCID50/m L,并与猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒无交叉反应。用该ELISA方法和RT-PCR方法检测48份临床粪便样品,结果显示,ELISA阳性检出率为39.6%,而RT-PCR方法检测卡的阳性检出率为43.8%。表明双抗体夹心ELISA方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好等优点,可用于PEDV快速检测。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  单克隆抗体  双抗体夹心ELISA  检测

Indirect sandwich ELISA for antigen detection of PEDV in feces
LI Yijing,LIU Bo,JIANG Yanping,CUI Wen,TANG Lijie,QIAO Xinyuan,LIU Min. Indirect sandwich ELISA for antigen detection of PEDV in feces[J]. Journal of Northeast Agricultural University, 2015, 0(2)
Authors:LI Yijing  LIU Bo  JIANG Yanping  CUI Wen  TANG Lijie  QIAO Xinyuan  LIU Min
Abstract:
Keywords:porcine epidemic diarrhea virus  monoclonal antibodies  indirect sandwich ELISA  detection
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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