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桉树ISSR-PCR反应体系的建立及优化
引用本文:曾艳玲,谢鹏,谢耀坚,谭晓风.桉树ISSR-PCR反应体系的建立及优化[J].中南林业科技大学学报,2008,28(1):44-48.
作者姓名:曾艳玲  谢鹏  谢耀坚  谭晓风
作者单位:[1]中南林业科技大学经济林育种与栽培国家林业局重点实验室,湖南长沙410004 [2]国家林业局桉树研究开发中心,广东湛江524022
摘    要:模板DNA、引物、dNTPs、Mg^2+的浓度,Taq DNA聚合酶的用量以及退火温度是影响简单序列重复区间扩增(ISSR-PCR)结果的主要因素.以桉树叶片基因组DNA为试材,系统地测试了这6个因素对桉树ISSR反应结果的影响.结果表明:最优化的反应体系即20μL反应体系中,含20 ng模板DNA、0.4μmol.L^-1随机引物、0.15 mmol.L^-1dNTPs、2.0 mmol.L^-1Mg^2+、1.25 U TaqDNA聚合酶.最佳退火温度为55℃;PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃再延伸7 min.

关 键 词:分子生物学  桉树  叶片基因组DNA  ISSR-PCR  优化  桉树  反应体系  最优化  System  Reaction  Eucalyptus  Optimization  循环  延伸  退火温度  预变性  程序  最佳  随机引物  ISSR  测试  系统  试材  基因组  树叶
文章编号:1673-923X(2008)01-0044-05
修稿时间:2007年7月5日

Establishment and Optimization of Eucalyptus ISSR-PCR Reaction System
ZENG Yan-ling,XIE Peng,XIE Yao-jian,TAN Xiao-feng.Establishment and Optimization of Eucalyptus ISSR-PCR Reaction System[J].Journal of Central South Forestry University,2008,28(1):44-48.
Authors:ZENG Yan-ling  XIE Peng  XIE Yao-jian  TAN Xiao-feng
Abstract:
Keywords:
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