| 鸭1型甲肝病毒亚型VP3基因的克隆与原核表达 |
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| 引用本文： | 黄剑梅,傅秋玲,傅光华,万春和,陈翠腾,陈珍,程龙飞,施少华,陈红梅,黄瑜. 鸭1型甲肝病毒亚型VP3基因的克隆与原核表达[J]. 福建农业学报, 2015, 0(5) |
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| 作者姓名： | 黄剑梅 傅秋玲 傅光华 万春和 陈翠腾 陈珍 程龙飞 施少华 陈红梅 黄瑜 |
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| 作者单位： | 1. 江西农业大学动物科学技术学院,江西 南昌,330045
2. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福建 福州,350013 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31472222)；福建省科技计划项目---省属公益类科研院所基本科研专项(2014R1023-3)；现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43)；福建省自然科学基金项目(2015J01113)；新世纪“百千万人才工程”国家级人选科研补助资金 |
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| 摘 要： | 参照鸭1型甲肝病毒亚型(DHAV-1a)的基因组序列设计了1对VP3基因特异性扩增引物,通过RT-PCR方法扩增获得了DHAV-1a结构蛋白VP3基因,将纯化的VP3基因与pEASYTM-Blunt Zero Cloning Vector连接,构建DHAV-1aVP3基因克隆重组质粒,然后将VP3基因片段插入pET-32a(+)表达载体,转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞。以1.0mmol·L-1 IPTG于37℃诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明VP3基因于大肠杆菌中成功表达,其分子量为47kDa,且表达的VP3蛋白能够与Anti-His Mouse mAb发生特异性反应,具有良好的生物活性,为进一步研究DHAV-1aVP3蛋白功能和以VP3蛋白为抗原研制DHAV-1a诊断试剂盒奠定基础。
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| 关 键 词： | 鸭1型甲肝病毒亚型 VP3基因 克隆 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression ofVP 3 Gene of Duck Hepatitis A Virus Type 1 Subtype |
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| HUANG Jian-mei,FU Qiu-ling,FU Guang-hua,WAN Chun-he,CHEN Cui-teng,CHEN Zhen,CHENG Long-fei,SHI Shao-hua,CHEN Hong-mei,HUANG Yu. Cloning and Prokaryotic Expression ofVP 3 Gene of Duck Hepatitis A Virus Type 1 Subtype[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2015, 0(5) |
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| Authors: | HUANG Jian-mei FU Qiu-ling FU Guang-hua WAN Chun-he CHEN Cui-teng CHEN Zhen CHENG Long-fei SHI Shao-hua CHEN Hong-mei HUANG Yu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | duck hepatitis A virus type 1a VP 3 gene cloning prokaryotic expression |
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