牛乳中乳源糖巨肽及β-酪蛋白的分离纯化

[目的]通过凝乳酶酶解牛乳得到乳源糖巨肽（CGMP），利用CGMP对三氯乙酸的耐受差异，实现CGMP的分离与纯化。利用β-酪蛋白在低温低酸条件下容易游离的特性，从凝乳酶酶解后的酪蛋白中分离出β-酪蛋白。[方法]鲜牛乳经过脱脂后，加入适量凝乳酶在35℃条件下充分酶解，酶解后样品离心后得到上清液和沉淀。在上清液中加入三氯乙酸实现CGMP的除杂和沉淀，得到固体CGMP采用高效液相色谱仪测定其纯度；沉淀经过碱性复溶降低温度后，在全程低温条件下调节pH值到3.5，低温离心取上层清液，升温至35℃，再次常温离心后得到β-酪蛋白，并用高效液相色谱仪测定其纯度。[结果]当TCA浓度达到10%时，溶液中CGMP全部析出。收集分离纯化后的CGMP固体，经高效液相色谱法检测，CGMP纯度为80%～90%。在低温低酸性条件下，分离得到纯度较高的β-酪蛋白，纯度为85%～90%。