蛋白激发子基因peaT1植物表达载体的构建及其转化棉花的研究* |
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作者姓名: | 唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 袁京京 邱德文 |
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作者单位: | 中国农业科学院植物保护研究所,农业部生物防治重点开放实验室,北京,100081 |
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摘 要: | [目的] 构建蛋白激发子基因 peaT1的植物表达载体并转化棉花品种‘CCRI24’。[方法] 设计含有 PstⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物,以质粒pET28a-peaT1为模板扩增得到 peaT1序列,将其通过中间载体pG4AS-cup克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,通过农杆菌介导法转化棉花品种‘CCRI24’,诱导并筛选抗性愈伤和胚性愈伤,通过PCR、southern杂交和RT-PCR检测筛选的棉株。[结果] 构建了含有增强子和多联终止子的植物表达载体pCAMBIA2300-peaT1,获得了大量的胚状体和4棵再生苗并嫁接成活,验证了蛋白激发子基因 peaT1已经整合到再生苗2和4基因组当中。[结论] 本研究为进一步开展蛋白激发子基因 peaT1转化棉花的研究提供了基础材料。
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关 键 词: | 蛋白激发子 peaT1 农杆菌 转化 棉花 |
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