牛抗精子抗体11E基因的原核表达及其活性研究

抗精子抗体11被认为在雄性生殖道的先天免疫及生殖方面起着重要的作用,牛抗精子抗体11E(SPAG11E)主要存在睾丸、附睾等生殖道中。本实验根据GenBank中牛SPAG11E基因序列(登录号:DQ838983.1)设计特异性引物,提取牛睾丸组织总RNA,经RT-PCR获得SPAG11E基因序列,构建原核表达载体,并转入BL21(DE3),利用IPTG诱导表达,同时检测了重组蛋白体外抑菌活性。结果显示,成功扩增了牛SPAG11E基因的CDS序列,其与GenBank公布序列相一致;正确构建了原核表达载体pET-32a(+)-SPAG11E,最佳表达条件为IPTG终浓度1.0mmol/L、诱导时间4h;重组蛋白对检测的6种菌没有明显的抑菌作用。