猪丹毒灭活疫苗效力检验血清学方法建立 |
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引用本文: | 张 媛,王甲,张一帜,李建,赵浩然,李巧玲,王秀丽,刘元杰,冯妍,李旭妮,彭国瑞,李俊平.猪丹毒灭活疫苗效力检验血清学方法建立[J].中国兽药杂志,2023,57(8):1-11. |
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作者姓名: | 张 媛 王甲 张一帜 李建 赵浩然 李巧玲 王秀丽 刘元杰 冯妍 李旭妮 彭国瑞 李俊平 |
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作者单位: | 中国兽医药品监察所,,,,,,,,,,,中国兽医药品监察所 |
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基金项目: | 兽药行业公益性重点专项“猪丹毒灭活疫苗生产用菌株检定标准再评价及疫苗效力检验替代方法研究”(GY202006) |
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摘 要: | 建立了猪丹毒丝菌抗体竞争ELISA检测方法,用于猪丹毒疫苗效力检验。用SpaA蛋白(纯度90%)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的SpaA蛋白单克隆抗体,建立猪丹毒丝菌竞争ELISA抗体检测方法,确定检测结果的判定标准,并对该方法的特异性、敏感性、重复性(批间重复性和批内重复性)等进行评价。建立效力检验血清学方法与免疫攻毒法的平行关系,并对两种方法符合率进行评价。结果表明,SpaA的最佳包被浓度为2.0 ng/μL,阴阳性对照血清的最佳稀释倍数为1∶75,HRP标记的单克隆抗体的最佳工作浓度为0.2 ng/μL。ELISA结果判定标准为血清样本抑制率PI≥8.0%时判定为阳性,PI<8.0%判定为阴性。该方法特异性良好,与空白小鼠阴性血清及A型和B型猪多杀性巴氏杆菌阳性血清均不发生交叉反应;敏感性良好,与敏感性血清样品可呈现不同梯度抑制率;重复性良好,批内重复和批间重复性试验结果变异系数均小于10%;与效力检验免疫攻毒法具备平行关系,小鼠血清效价≥1∶100时可抵抗1000 MLD强毒攻击;对用不同冻干代次菌种制备的4批猪丹毒丝菌灭活抗原和来自4家企业的7批猪丹毒灭活疫苗进行检测并...
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关 键 词: | 猪丹毒 疫苗 效力检验 竞争ELISA |
收稿时间: | 2022/10/24 0:00:00 |
修稿时间: | 2023/7/15 0:00:00 |
Establishment of Serological Method for Efficacy Test of Inactivated Swine Erysipelas Vaccine |
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Institution: | China Institute of Veterinary Drug Control,,,,,,,,,,, |
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Abstract: | |
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Keywords: | Erysipelothrix rhuriopathiae vaccine efficacy test competitive ELISA |
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