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水稻OsUAP2基因生物信息学分析及原核表达活性鉴定
引用本文:肖桂青,陈雅婷,周嘉豪,文媛,高敏,张海文,卢向阳. 水稻OsUAP2基因生物信息学分析及原核表达活性鉴定[J]. 分子植物育种, 2022, 0(1)
作者姓名:肖桂青  陈雅婷  周嘉豪  文媛  高敏  张海文  卢向阳
作者单位:湖南农业大学生物科学技术学院;中国农业科学院生物技术研究所
基金项目:国家自然科学基金项目(31701781);湖南省自然科学基金项目(2020JJ4365);湖南农业大学“1515”人才项目;湖南农业大学创新训练计划项目(s202010537077)共同资助。
摘    要:UAGPase广泛存在于生物体,是糖代谢过程中一类重要酶。我们前期发现水稻Os UAP1具有单向催化UDPG分解代谢活性,Os UAP2与Os UAP1序列相似性极高。本研究对Os UAP2进行生物信息学分析,构建并表达重组蛋白,并鉴定其酶蛋白活性。结果表明,OsUAP2基因位于4号染色体,编码区序列长1482 bp,编码493个氨基酸;Os UAP2具有UDPGP保守结构域,无跨膜区域,N-端不含信号肽;二级结构分析显示,该蛋白含α-螺旋和无规则卷曲较多;同源性分析表明,Os UAP2与玉米UAGPase的亲缘关系最近。在16℃下经0.1 mmol/L IPTG诱导8 h,原核菌株BL21表达出分子量约55 kD可溶性重组蛋白。体外酶活性测定表明,Os UAP2能同时催化UDPG降解和合成,表现出双向可逆催化的特点。本研究结果为进一步深入研究OsUAP2基因的生物学功能提供了科学依据。

关 键 词:水稻  OsUAP2  原核表达蛋白  酶活测定

Bioinformatics Analysis and Prokaryotic Expression Identification of OsUAP2 Gene in Rice
Xiao Guiqing,Chen Yating,Zhou Jiahao,Wen Yuan,Gao Min,Zhang Haiwen,Lu Xiangyang. Bioinformatics Analysis and Prokaryotic Expression Identification of OsUAP2 Gene in Rice[J]. Molecular Plant Breeding, 2022, 0(1)
Authors:Xiao Guiqing  Chen Yating  Zhou Jiahao  Wen Yuan  Gao Min  Zhang Haiwen  Lu Xiangyang
Affiliation:(College of Bioscience and Biotechnology,Hunan Agricultural University,Changsha,410128;The Biotechnology Research Institute(BRI)of Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing,100081)
Abstract:
Keywords:Rice  OsUAP2  Prokaryotic protein expression  Enzymatic activity assay
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