| 菜心ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 作者姓名： | 孙雪梅 乔爱民 孙敏 桂腾琴 |
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| 作者单位： | [1]西南大学生命科学学院,重庆400715 [2]仲恺农业技术学院农业与园林学院,广州510225 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目（B1010412）. |
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| 摘 要： | 以菜心（Brassica campestris L．ssp．Chinensis Var．utilis Tssen．et Lee．）为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg^2＋、Taq DNA聚合酶、dNTPs、Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨,确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数：在25pL反应体系中含10×buffer 2．5μL,2．0mmol／LMg^2＋,0．5U Taq DNA聚合酶,0．2mmol／LdNTPs,0．5μmol／L引物,30ng模板DNA．PCR扩增程序：94℃预变性3min;94℃变性1min,49．7～56℃退火（退火温度随引物不同而定）1min,72℃延伸45s,40个循环;72℃延伸5min．
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| 关 键 词： | 菜心 简单序列重复间区（ISSR） 反应体系 |
| 文章编号： | 1673-9868（2007）10-0129-05 |
| 修稿时间： | 2007-04-03 |
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