‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入 |
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引用本文: | 张燕征,张梦洋,李继东,谭彬,王腾飞,郑先波,叶霞,冯建灿.‘蜂蜜罐’枣遗传转化条件的优化及Bt基因的导入[J].河南农业大学学报,2018(1). |
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作者姓名: | 张燕征 张梦洋 李继东 谭彬 王腾飞 郑先波 叶霞 冯建灿 |
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作者单位: | 河南农业大学林学院;河南省果树瓜类生物学重点实验室;河南农业大学园艺学院; |
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摘 要: | 为建立‘蜂蜜罐’枣高效遗传转化体系,以‘蜂蜜罐’枣胚培苗上胚轴和子叶为外植体进行转化,研究了不同菌液浓度、侵染时间、共培养时间、AS(乙酰丁香酮)浓度和侵染方式对gus(β-葡糖醛酸糖苷酶)基因瞬时表达率的影响。结果表明,当菌液OD_(600)值为0.5,真空辅助侵染10 min,共培养3 d,上胚轴和子叶外植体的共培养培养基中分别添加20和10 mg·L~(-1)乙酰丁香酮时,其gus瞬时表达率均最高,为最佳遗传转化体系。利用已优化的遗传转化体系进行Bt基因转化,共获得24个PCR(聚合酶链式反应)检测呈阳性的再生芽;对PCR检测呈阳性的不定芽进行伸长培养和不定根诱导,最终获得完整转基因植株。本研究初步获得了转Bt(苏云金芽孢杆菌)基因的枣植株,为通过转基因手段进行枣抗虫新种质选育提供可能。
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