| PCV-2、PPV和PRV多重PCR检测方法的建立及初步应用 |
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| 引用本文： | 陈光达,许信刚,童德文.PCV-2、PPV和PRV多重PCR检测方法的建立及初步应用[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(11):1-6. |
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| 作者姓名： | 陈光达 许信刚 童德文 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 动物医学院;西北农林科技大学 动物医学院 |
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| 基金项目： | 陕西省科技攻关项目（2009K02-01）；西北农林科技大学青年学术骨干项目（E111020901）；教育部新世纪优秀人才支持计划项目（NCET-07-0701） |
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| 摘 要： | 【目的】建立可用于临床同时检测PCV-2、PPV和PRV 3种DNA病毒感染的多重PCR方法。【方法】根据GenBank中收录的PCV-2、PPV和PRV的基因组序列,选择3种病毒的特异性保守区设计3对引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立了能够同时检测3种病毒混合感染的多重PCR方法,对该方法的特异性、敏感性、稳定性进行检测,并将其用于临床病料的检测。【结果】多重PCR方法中,当引物浓度均为1.0μmol/L,退火温度为57.2℃时,各目的片段均可较好地扩增。特异性试验结果表明,建立的多重PCR方法可从PCV-2、PPV、PRV病毒DNA中分别扩增出长度为353,265和198bp的目的片段,从3种病毒DNA的混合物中也可扩增出上述目的片段,而其他对照组的扩增结果均呈阴性。敏感性试验结果表明,建立的多重PCR方法对PCV-2、PPV和PRV的最低检测量分别为26.88,25.34和24.9pg/μL。在不同时间对每份样品重复检测3次,结果一致,表明该方法具有良好的可重复性。临床应用结果表明,39份疑似病料中,PCV-2、PPV和PRV的阳性率分别为53.84%,17.95%和5.13%,PCV-2与PPV混合感染的阳性率为15.38%,PCV-2、PPV和PRV混合感染的阳性率为2.57%。【结论】建立的多重PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好,可以有效检测PCV-2、PPV和PRV的混合感染。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 猪细小病毒 猪伪狂犬病病毒 多重PCR |
| 收稿时间： | 4/7/2011 12:00:00 AM |
Establishment and initial application of multiplex PCR assay for detecting PCV-2,PPV and PRV infection |
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| CHEN Guang-da,XU Xin-gang,TONG De-wen.Establishment and initial application of multiplex PCR assay for detecting PCV-2,PPV and PRV infection[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(11):1-6. |
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| Authors: | CHEN Guang-da XU Xin-gang TONG De-wen |
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| Institution: | CHEN Guang-da,XU Xin-gang,TONG De-wen(College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCV-2 PPV PRV multiplex PCR |
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