鸡白细胞介素18基因的克隆与原核表达 |
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引用本文: | 宋佰芬,李晓婷,崔玉东.鸡白细胞介素18基因的克隆与原核表达[J].安徽农学通报,2016,22(17):19-21. |
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作者姓名: | 宋佰芬 李晓婷 崔玉东 |
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作者单位: | 黑龙江八一农垦大学,黑龙江大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,黑龙江大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,黑龙江大庆,163319 |
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基金项目: | 黑龙江农垦总局项目:鸡干扰素-γ和白细胞介素-18融合表达及应用效果初步分析(HNK125A-11-05) |
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摘 要: | 白介素18(IL-18)最早被称为干扰素诱导因子(interferon-γ-inducing factor,IGIF),是近年发现的一种重要的免疫调节因子。该实验根据Gen Bank中已公布的鸡IL-18的基因序列,设计并合成了一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出IL-18基因,并将该基因克隆到p MD18-T载体中,经过质粒酶切、PCR和测序鉴定,阳性克隆命名为Chp MD18-T-IL-18。将Chp MD18-T-IL-18双酶切后与p ET32a表达载体连接,转化到大肠杆菌BL21感受态细胞中,经IPTG诱导表达鸡IL-18蛋白,结果表明,在28k D左右出现了目的条带,经west-ern blot检测确定该蛋白获得高效表达,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
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关 键 词: | 鸡 白细胞介素18 原核表达 |
The Cloning and Prokaryotic Expression of Chicken Interleukin-18 Gene |
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Abstract: | |
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