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猪血凝性脑脊髓炎病毒抗原捕获ELISA诊断方法的建立
引用本文:赵传博,王丽,董波,陆慧君,赵魁,贺文琦,高丰.猪血凝性脑脊髓炎病毒抗原捕获ELISA诊断方法的建立[J].中国兽医学报,2013,33(4).
作者姓名:赵传博  王丽  董波  陆慧君  赵魁  贺文琦  高丰
作者单位:1. 吉林大学动物医学学院,吉林长春,130062
2. 吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林长春,130062
3. 吉林大学动物医学学院,吉林长春130062;吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林长春130062
基金项目:国家自然科学基金资助项目
摘    要:采用实验室保存的杂交瘤细胞,通过扩大培养、接种小鼠、收集腹水、腹水纯化等程序得到了猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)单克隆抗体,并对其效价进行了测定.用HEV单克隆抗体作为检测抗体,猪多抗作为捕获抗体,建立了检测HEV的抗原捕获ELISA方法,通过对各步反应条件的优化,最终获得最佳工作条件为:猪多抗1:2 000稀释,单抗1:4 000稀释,酶标抗体为1:4 000稀释.特异性和敏感性试验结果表明:该方法对TGEV、HCV、PEDV和PRV等病毒无特异性交叉反应,其最低检测下线为3.75 mg/L.与RT-PCR方法的对比试验证明,抗原捕获ELISA阳性检出结果与PCR方法相一致.上述结果说明,已成功建立特异、敏感的用于HEV检测的抗原捕获ELISA方法,为临床快速诊断HEV试剂盒的研制奠定了基础.

关 键 词:猪血凝性脑脊髓炎病毒  单克隆抗体  抗原捕获ELISA

Development of antigen capture ELISA for detecting hemagglutinating encephalomyelitis virus of pigs
Abstract:
Keywords:
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