| 猪IL-18在酵母中表达及活性检测 |
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| 引用本文： | 曹素芳,祁画丽.猪IL-18在酵母中表达及活性检测[J].中国兽医杂志,2013,49(6). |
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| 作者姓名： | 曹素芳 祁画丽 |
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| 作者单位： | 郑州牧业工程高等专科学校,河南郑州,450011 |
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| 基金项目： | 河南省教育厅自然科学研究计划项目 |
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| 摘 要： | 以pGEMT/pIL-18为模板,应用PCR法扩增出猪IL-18基因,用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后,插入酵母表达载体pPICZαA中,经酶切、PCR扩增及序列测定,成功构建了酵母重组表达载体pPICZ/pIL-18,电击转化毕赤酵母X-33,应用Zeocin筛选获得高拷贝重组转化菌株,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析重组pIL-18蛋白的表达,并用SephadexG200纯化表达的重组pIL-18蛋白.运用MTT法检测其生物学活性.试验结果表明,重组X-33酵母菌株能够表达分泌性pIL-18,诱导72 h表达量最高,其表达量占总蛋白表达量的38％.而且纯化的重组pIL-18蛋白具有明显促进淋巴细胞增殖的活性.
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| 关 键 词： | 猪 白细胞介素18 毕赤酵母 生物活性 |
Expression and bioactivity detection of porcine mature interkine-18 in Pichiapastoris |
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| CAO Su-fang
,
QI Hua-li.Expression and bioactivity detection of porcine mature interkine-18 in Pichiapastoris[J].Chinese Journal of Veterinary Medicine,2013,49(6). |
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| Authors: | CAO Su-fang QI Hua-li |
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