| 家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化 |
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| 引用本文： | 汤强,方玲,章玉萍.家蚕G蛋白α亚基基因BmGα73B原核表达及其表达条件优化[J].中国蚕业,2012,33(3):19-22. |
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| 作者姓名： | 汤强 方玲 章玉萍 |
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| 作者单位： | 1. 芜湖职业技术学院,安徽芜湖,241003
2. 安徽省农业科学院蚕桑研究所,安徽合肥,230061 |
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| 基金项目： | 安徽省高校自然科学基金项目（编号KJ20128218）;安徽省农业科学院院长青年创新基金项目（编号11B0625）;安徽省芜湖职业技术学院博士科研启动基金项目. |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR技术从家蚕中扩增出G蛋白α亚基基因BmGα73B的cDNA,克隆至原核表达载体pET-41b(+)中,所获得的重组质粒经酶切鉴定后,将其转化至E coli BL21诱导表达,用SDS-PAGE与Western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,通过RT-PCR扩增获得长度为1 158 bp的蛋白基因,诱导表达重组质粒pET-41b(+)-Gα73B,经SDS-PAGE检测,IPTGr的终浓度为1 mmol/L时,诱导4 h时蛋白表达量最高,出现分子质量约为73 kD的目的蛋白带,与蛋白的理论值相符。经Western blot检测,表达产物可与GST发生特异性反应。
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| 关 键 词： | G蛋白α亚基 BmGα73B RT-PCR 克隆 原核表达 |
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