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里氏木霉木聚糖酶XYNⅡ基因在毕赤酵母中的分泌表达
引用本文:欧阳嘉,王向明,张清,严明,许琳.里氏木霉木聚糖酶XYNⅡ基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].林产化学与工业,2007,27(5):83-88.
作者姓名:欧阳嘉  王向明  张清  严明  许琳
作者单位:1. 南京林业大学,化学工程学院,江苏,南京,210037;南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009
2. 南京工业大学,制药与生命科学学院,江苏,南京,210009
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:采用RT-PCR方法克隆到里氏木霉Rut C-30木聚糖酶(XYN Ⅱ)的cDNA序列.测序结果表明,XYN Ⅱ的cDNA基因开放阅读框长度为669bp,编码223个氨基酸,N端1~19个氨基酸为潜在的信号肤序列,删去潜在信号肽序列,将里氏木霉木聚糖酶的基因(xyn Ⅱ)构建到巴斯德毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K上,线性化后电击转化到巴斯德毕赤酵母中,经G418筛选和PCR鉴定后的转化子用1%的甲醇进行诱导,对重组木聚糖酶活检测显示该基因能在毕赤酵母中表达有生物活性的XYNⅡ并分泌到胞外.发酵液中的酶活在诱导培养60h达到1.45IU/mL,最适酶解温度为50℃,最适pH值为6.0.

关 键 词:里氏木霉  木聚糖酶  毕赤酵母  分泌表达
文章编号:0253-2417(2007)05-0083-06
修稿时间:2006-11-25

Secretory Expression of Trichoderma reesei XYN Ⅱ Gene in Pichia pastoris
OUYANG Jia,WANG Xiang-ming,ZHANG Qing,YAN Ming,XU Lin.Secretory Expression of Trichoderma reesei XYN Ⅱ Gene in Pichia pastoris[J].Chemistry & Industry of Forest Products,2007,27(5):83-88.
Authors:OUYANG Jia  WANG Xiang-ming  ZHANG Qing  YAN Ming  XU Lin
Institution:1. College of Chemical Engineering,Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China; 2. College of Life Science and Pharmacy, Nanjing University of Technology, Nanjing 210009, China
Abstract:
Keywords:Trichoderma reesei  xylanase  Pachia pastoris  secretory expression
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