猫杯状病毒抗原检测胶体金试纸条的研制

以浓缩纯化的猫杯状病毒(feline calicivirus, FCV)免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合，用间接ELISA试验检测细胞培养上清，获得5株阳性杂交瘤细胞克隆株，命名为1E2、4C3、5F11、6G9和7D2,分别制备腹水后进行纯化。以多克隆抗体为金标抗体，腹水ELISA和中和效价较高的单抗(4C3)作为检测线抗体，羊抗兔二抗为质检抗体，制备检测FCV病毒抗原的免疫胶体金快速诊断试纸条。在pH为7.4的条件下，金标抗体的最适质量浓度为0.1 g/L,检测线最佳包被质量浓度为1.0 g/L,质控线最终质量浓度为0.5 g/L。经检测该试纸条具有敏感性高，特异性强，稳定性好的特点，用制备的胶体金试纸条与RT-PCR方法同时对76份猫鼻咽拭子进行检测，比较两者的符合率，符合率在90%以上。结果表明，本试验研制的胶体金试纸条可以用于FCV的临床检测。