| 环形泰勒虫与牛无浆体双重PCR方法的建立 |
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| 引用本文： | 葛晓敏,缪荣浩,李才善,陈宋琴,温丽翠,刘凯强,刘燕,郑会珍,巴音查汗,郭庆勇.环形泰勒虫与牛无浆体双重PCR方法的建立[J].中国兽医学报,2023(3):504-511. |
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| 作者姓名： | 葛晓敏 缪荣浩 李才善 陈宋琴 温丽翠 刘凯强 刘燕 郑会珍 巴音查汗 郭庆勇 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学动物医学学院 |
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| 基金项目： | 新疆自治区高校科研计划自然科学基金资助项目(XJEDU20201008)； |
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| 摘 要： | 旨在建立快速检测环形泰勒虫和牛无浆体的双重PCR方法，调查吐鲁番地区这2种病原感染情况。根据NCBI库中上传的环形泰勒虫Spm2、Tams1基因和牛无浆体16S rRNA基因保守序列设计、合成3对特异性引物，使用PCR扩增并测序。根据Spm2和16S rRNA基因设计双重PCR并对反应体系及条件进行优化，对该方法进行特异性、灵敏性和重复性检测，建立一种双重PCR方法。结果显示，双重PCR方法特异性扩增出环形泰勒虫和牛无浆体相应目的片段，片段大小分别为853,351 bp,而驽巴贝斯虫、马泰勒虫、绵羊无浆体和伊氏锥虫均未扩增出条带。对环形泰勒虫Spm2、Tams1和牛无浆体16S rRNA基因序列进行系统发育分析，环形泰勒虫Spm2基因序列与印度株同源关系最近(MH844677)、Tams1基因序列与突尼斯株同源关系近(AF214899),牛无浆体16S rRNA基因序列与突尼斯株同源关系近(KY655808)。此方法能检测环形泰勒虫与牛无浆体最低浓度分别为2.9×10-16,1.8×10-19 g/μL。用该方法对临床60份牛血DNA进行双重...
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| 关 键 词： | 环形泰勒虫 牛无浆体 双重PCR法 |
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