鸡传染性贫血病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用 |
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引用本文: | 徐晴晴,王峰,王文秀,莫玲,沈志强.鸡传染性贫血病毒CRISPR/Cas13a检测方法的建立及初步应用[J].中国兽医学报,2023(4):681-686. |
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作者姓名: | 徐晴晴 王峰 王文秀 莫玲 沈志强 |
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作者单位: | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院博士后科研工作站;2. 扬州大学博士后科研流动站;3. 太仓广东温氏家禽有限公司 |
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摘 要: | 为了快速、准确和简便地检测鸡传染性贫血病毒(chicken infectious anemia virus, CIAV),本研究参照GenBank中CIAV的VP2基因设计了特异的RPA引物和用于LwCas13a反应系统的crRNA,通过优化反应条件建立了检测CIAV的CRISPR/Cas13a方法,并验证了该方法的特异性、敏感性和复合性。结果显示,该法对感染鸡的其他常见病毒的检测均为阴性,特异性良好无交叉反应;灵敏度为50 copies/μL;与PCR的检测结果有很好的符合率。本研究建立的CRISPR/Cas13a检测方法配合试纸条显色在1.5 h内可对CIAV进行快速的鉴别诊断,为该病的诊断及防控净化提供了强有力的技术支撑。
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关 键 词: | 鸡传染性贫血病毒 RPA crRNA Cas13a |
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