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小金海棠抑制性消减cDNA文库的构建及文库质量分析
引用本文:张玉刚,许雪峰,李天忠,韩振海. 小金海棠抑制性消减cDNA文库的构建及文库质量分析[J]. 勤云标准版测试, 2005, 0(3)
作者姓名:张玉刚  许雪峰  李天忠  韩振海
作者单位:中国农业大学农学与生物技术学院园艺植物研究所 北京100094(张玉刚,许雪峰,李天忠),中国农业大学农学与生物技术学院园艺植物研究所 北京100094(韩振海)
摘    要:
构建小金海棠抑制性消减文库,为进一步大量筛选、克隆苹果铁高效基因、果树转基因工程奠定基础.试验是在提取水培条件下小金海棠缺铁(ETA-Fe2 ,4μmol/L)和正常供铁(EDTA-Fe2 ,40μmol/L)的根的总RNA,经过LD-pCR扩增双链cDNA后,利用抑制性消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次抑制性PCR,构建了小金海棠缺铁条件下包含1200个独立克隆的消减cDNA文库.用菌落PCR检测,结果显示插入片段大小范围在300~800bp之间,提取质粒进行PCR和质粒RsaⅠ酶切同样也得到一致性的结果.

关 键 词:小金海棠  抑制性消减杂交  cDNA文库

Construction of Subtracted cDNA Library of Malus xiaojinensis with Suppression Subtractive Hybridization and Their Quality Analysis
Zhang Yugang,Xu Xuefeng,Li Tianzhong Han Zhenhai. Construction of Subtracted cDNA Library of Malus xiaojinensis with Suppression Subtractive Hybridization and Their Quality Analysis[J]. , 2005, 0(3)
Authors:Zhang Yugang  Xu Xuefeng  Li Tianzhong Han Zhenhai
Affiliation:(Institute for Horticultural Plants, College of Agronomy and Biotechnology, China Agricultural University, Beijing 100094)
Abstract:
Keywords:Malus xiaojinensis   Suppression subtractive hybridization(SSH)   Subtracted cDNA library
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