兔出血症病毒间接ELISA抗体检测方法的建立 |
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引用本文: | 张连芝,王樱历,路化梅,李建亮,胡峰,李富金,肖跃强,黄兵,崔言顺.兔出血症病毒间接ELISA抗体检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2018(1). |
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作者姓名: | 张连芝 王樱历 路化梅 李建亮 胡峰 李富金 肖跃强 黄兵 崔言顺 |
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作者单位: | 山东农业大学动物科技学院;山东省农业科学院家禽研究所;齐鲁动物保健品有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院; |
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摘 要: | 为建立兔出血症病毒(RHDV)的血清学检测方法,本实验通过生物信息学分析,将RHDV衣壳蛋白VP60的3个区域VP60-1(aa2-aa208)、VP60-2(aa174-aa425)和VP60-3(aa342-aa579)分别进行原核表达,获得了大小为42 ku、47.5 ku和45.6 ku的重组蛋白。经ELISA和western blot试验分析显示3种重组蛋白均能够被RHDV阳性血清识别,但VP60-1较VP60-2和VP60-3具有更好的反应原性,因此以表达的重组蛋白VP60-1作为包被抗原建立了RHDV间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该方法具有较好的敏感性、特异性和重复性,对不同免疫期兔血清的检测结果与HI呈显著相关性。对临床样品的检测结果表明该ELISA方法比HI试验更敏感。本研究以VP60-1为包被抗原建立的ELISA方法可以用于RHDV疫苗的免疫评估。
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